Zytologische Untersuchungen
Bei der zytologischen Untersuchung werden einzelne Zellen und Zellverbände schonend entnommen, gefärbt und unter dem Mikroskop untersucht.
Die Entnahme erfolgt entweder direkt von der Haut oder Schleimhaut (Exfoliativzytologie, z.B. Gebärmutterhals, Mundschleimhaut) oder es werden Körperflüssigkeiten untersucht (Punktionszytologie, z.B. Pleuraerguß, Ascites). Schließlich können auch innere Organe mit sehr feinen Nadeln punktiert werden um Zellmaterial zu gewinnen (Aspirationszytologie, z.B. Schilddrüse, Knochenmark, Lymphknoten).
Zytologische Untersuchungen geben Aufschluss darüber, ob bei den entnommenen Zellen reaktiv-entzündliche oder neoplastische Veränderungen bestehen.
Gynäkologische Zytologie
Das Institut für Pathologie und Zytologie Marburg hat einen besonderen Schwerpunkt in der gynäkologischen Vorsorgezytologie. Wir beurteilen ca. 60.000 Zervixabstriche pro Jahr. Hierzu werden die Präparate von speziell ausgebildeten Assistenten (CTA) und Pathologen beurteilt und ein standardisierter Befund nach der Münchner Nomenklatur III erstellt. Diese seit Juli 2014 verbindliche Nomenklatur berücksichtigt neue Erkenntnisse in der Tumorbiologie des Zervixkarzinoms und seiner Vorstufen und trägt dem gestiegenen Anspruch an die Sensitivität, neuesten statistischen Auswertungen und der Vergleichbarkeit mit dem international verwendeten Bethesda-System Rechnung. Ziel ist es, anhand standardisierter Kriterien eine möglichst präzise Aussage über das biologische Verhalten einer detektierten Läsion zu erlangen. Darüber hinaus können im zytologischen Präparat relevante Infektionen und mögliche Erreger diagnostiziert und Aussagen zum Proliferationsgrad getroffen werden.
Neben der konventionellen Zytologie kommen heute moderne und qualitativ hochwertige Untersuchungsmethoden zum Einsatz, die es ermöglichen, den positiven Prädiktionswert der Untersuchung noch zu steigern. Das humane Papilloma-Virus (HPV) ist in der Pathogenese des Zervixkarzinoms von entscheidender Bedeutung. Die Mechanismen der Infektion, Integration in das Erbgut, onkogenen Transformation aber auch Remission werden immer detaillierter beschrieben und in ihrer Bedeutung verstanden.
Einsatz von Biomarken am zytologischen Abstrich (CINTec-Plus-® Methode)
Die konventionelle Zytologie und Gruppierung nach der Münchner Nomenklatur III ermöglicht in der überwiegenden Mehrzahl der Fälle eine sichere Aussage mit hohem positivem Prädiktionswert. Es gelingt jedoch nicht in allen Fällen eine sichere Unterscheidung zwischen reaktiv-entzündlichen und dysplastischen Veränderungen. Außerdem ist die biologische Bedeutung von dysplastischen Veränderungen bei HPV-positiven Patientinnen sehr variabel und lässt sich oft nur im Verlauf der morphologisch-kolposkopischen Befunde bewerten.
Dieser individuelle Verlauf einer Infektion mit möglicher onkogener Transformation liegt in den unterschiedlichen Subtypen des Virus, dem komplizierten Vermehrungszyklus mit möglichen Ruhephasen und der jeweiligen Immunkompetenz der Patientin begründet.
Die Kenntnisse der genauen molekularen Veränderungen im Verlauf einer HPV-Infektion ermöglichen es, das Stadium einer Erkrankung zu erkennen, in der es zu einer irreversiblen Erbgutveränderung gekommen ist und die Wahrscheinlichkeit einer malignen Entartung sehr hoch ist (onkogene Transformation).
Die CINTec-Plus-® Methode detektiert am zytologischen Ausstrichpräparat das p16 INK4a- Protein. Unter physiologischen Umständen ist es ein Protein mit antiproliferativem Effekt im Zellzyklus und lässt sich in geringem Umfang in nahezu allen Körperzellen nachweisen. Eine Infektion mit dem HP-Virus und anschließender onkogener Transformation führt dazu, dass dieses Protein vermehrt produziert wird und über weitere Reaktionskaskaden die Zellteilung beschleunigt. Als zweiter Marker dient das Ki-67-Protein. Es wird ausschließlich in proliferierenden Zellen im Kern nachgewiesen.
Die gleichzeitige Expression des p16 INK4a-Protein und des Ki-67-Protein ist physiologischerweise in Körperzellen nicht zu beobachten und spricht für einen deregulierten Zellzyklus. Die Doppelfärbung von p16 und Ki67 an dysplastischen Zellen wird als hochspezifisch für eine onkogene Transformation und ein erhöhtes Progressionsrisiko der Läsion angesehen.
Als weitere Zusatzmethoden der gynäkologischen Zytologie sind etabliert:
- Computerassistiertes Screening (BD Focal Point TM GS Imaging System)
- Dünnschichtzytologie (Thin Prep ®Pap Test)
- Hybrid-Capture ® HPV DNA- Test
Nachweis von für das Zervixkarzinom und seinen Vorstufen bedeutsamen HP- Virus Subtypen mittels der PCR- Methode
Es sind aktuell weit mehr als 120 humane Papilloma-Virus Subtypen bekannt, von denen mehr als 40 die Genitalorgane befallen können. Ein Teil der Viren führt zur Entstehung harmloser Feigwarzen (Condylome), andere lösen Infektionen der Cervix uteri aus, die mit dem Risiko einer onkogenen Transformation einhergehen.
Virussubtypen mit hohem onkogenen Transformationsrisiko
(sogenannte high-risk-Typen): 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73, 82
Virussubtypen mit niedrigem onkogenen Transformationsrisiko
(sogenannte low-risk-Typen): 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81
Der Nachweis eines HPV-Infektion hat ohne weitere additive Methoden und Korrelation mit dem konventionellen Abstrichbefund nur einen geringen positiven Vorhersagewert für die Entstehung einer schweren Dysplasie oder eines Zervixkarzinoms, da 90 % der HPV-Infektionen innerhalb von zwei Jahren auch ohne Therapie ausheilen. Ein isolierter Virusnachweis ohne zytologisches oder kolposkopisches Korrelat wird daher von mehreren Fachgesellschaften als alleiniges Vorsorge- und Früherkennungsinstrument kritisch beurteilt.
Diese Zusatzuntersuchung wird im Netzwerk Pathologie (Link) angeboten.
Extragynäkologische Zytologie
In gewonnenen Flüssigkeiten werden durch Zytozentrifugation Zellen angereichert und konventionell zytologisch beurteilt. Histochemische Untersuchungen (PAS-Reaktion, Berliner-Blau-Reaktion zum Eisennachweis) sind ebenso möglich wie der Nachweis von Erregern (Ziehl-Neelsen-Färbung für säurefeste Stäbchen) und immunzytologische Methoden (Lymphozytensubtypisierung).
In der Regel gelingt es, angereicherte Zellen in ein eiweißhaltiges Medium zu überführen und somit der histologischen Bearbeitung zugänglich zu machen (Zytoblock-Technik).
An dem so aufbereiteten Material können weitere immunzytologische und molekulare Untersuchungsmethoden eingesetzt werden.
Aspirationszytologie
Aus jeder für die Feinnadel-Punktion zugänglichen Region des Körpers können durch Aspiration Zellen und Zellgruppen gewonnen werden. Diese werden in der Regel konventionell zytologisch beurteilt. Im Kontext mit den klinisch-bildgebenden Befunden wird der zytologische Befund erstellt. In Anlehnung an die Münchner Nomenklatur kann eine Einstufung der Veränderungen in verschiedene Befundgruppen erfolgen, z.B. Gruppe I negativ = benigne bis Gruppe V positiv = maligne.
